0572-2022975
GA化学修饰siRNA作用机制基于目前研究结果表明是通过Dicer解链siRNA双链结构，反义互补RNA单链再利用AGO2和其他蛋白形成沉默复合体（RISC）对目标RNA进行降解。GA化学修饰siRNA是特殊化学修饰的一段长21个核苷酸的双链RNA，即用型。对合成的siRNA进行一系列化学修饰以提高siRNA的稳定性、降低脱靶效应。适合动物体内干扰实验，并且在体内实验中具有更高的稳定性和抑制效果，可采用全身注射或局部注射等多种方式给药，操作简便。
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关键难题 |
标准的siRNA |
GA化学修饰siRNA |
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siRNA 降解 |
标准的非修饰的siRNA在细胞培养过程中很容易降解，虽然在大部分的离体实验中是有效的，但是在细胞培养中寿命较短。 |
GA化学修饰siRNA不仅增强了在血清和细胞培养中的寿命，而且加强了在离体条件下的应用能力。 |
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作用时效 |
作用时间较短，一般情况下为1-3天。 |
GA化学修饰siRNA作用时间长，比标准的siRNA的作用时间延长一倍左右。 |
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活体应用的活性 |
标准的siRNA稳定性较差，一般不适用于体内试验。 |
GA化学修饰siRNA在体内的稳定性强。 |
基安生物可提供的化学修饰品类：
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编号 |
修饰方式 |
修饰标记位置 |
修饰作用 |
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5’ |
middle |
3’ |
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1 |
2’-OMe |
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√ |
√ |
增强抗核酸酶活性的能力，提高RNA稳定性 |
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2 |
2’-F |
√ |
√ |
√ |
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3 |
Phosphorothioate |
— |
√ |
— |
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4 |
2’-MOE |
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√ |
√ |
提高稳定性以及与靶向效力，降低细胞毒性 |
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5 |
LNA |
— |
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— |
具有高亲和力,能够提高与靶标分子的稳定性,增加熔解温度(Tm值); |
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6 |
Cholesterol |
√ |
— |
√ |
提高转染效率以及RNA稳定性 |
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7 |
GALNAC |
— |
— |
√ |
具有肝脏靶向性和长效抑制作用 |
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8 |
FAM |
√ |
— |
— |
具有荧光，优化各种细胞的转染条件，跟踪RNA在细胞或者动物的位置分布 |
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9 |
Cy3 |
√ |
— |
√ |
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10 |
Cy5 |
√ |
— |
√ |
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11 |
Amino |
√ |
— |
√ |
用于连接一些不会影响其功能的化合物，可以抑制外切酶酶解 |
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12 |
Thiol |
√ |
— |
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用于加附各种修饰如荧光标记物和生物素。 |
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13 |
Biotin |
√ |
— |
√ |
生物素修饰具有结合链霉亲和素的特性，可用于非放射性免疫分析。 |
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14 |
Phosphorylation |
√ |
— |
— |
磷酸化可用于接头、克隆和基因构建以及连接酶催化的连接反应 |
几种常见的给药方式：
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常见给药方式 |
适应模型 |
备注说明 |
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局部给药 |
局部给药一般通过注射﹑滴入﹑涂抹或喷雾等方式直接导入到一个特定的组织或器官中。最直接，效果佳，用量小，能快速被吸收。 |
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系统给药 |
循环系统（免疫系统）、作用于血流丰富的脏器（肝脏、心脏、肺脏、肾脏、脾脏，肿瘤组织）、腹腔等。 |
系统给药一般采用静脉注射，一些无法通过具体直接给要的脏器和靶点。 |
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靶向性给药 |
利用载体（纳米材料，LNP，GalNAc等）将核酸药物选择性靶向病灶或者特定给药部位。 |
低免疫原性，低细胞毒性，高靶向性 |
不同产品给药剂量推荐：
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动物用核酸产品 |
通用给药剂量（单次） |
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小鼠局部给药 |
大鼠局部给药 |
小鼠系统给药 |
大鼠系统给药 |
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GA化学修饰siRNA |
1~10nmol |
2~15nmol |
5~20nmol |
20~100nmol |
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GA化学修饰ASO |
1~10nmol |
2~15nmol |
5~20nmol |
20~100nmol |
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agomir |
1~10nmol |
2~15nmol |
5~20nmol |
20~100nmol |
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antagomir |
5~20nmol |
10-50nmol |
50~200nmol |
200~1000nmol |
不同给药部位及给药方式的给药体积参考
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给药体积 |
小鼠 |
大鼠 |
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颅内（海马体）注射 |
1~4 uL |
2-5 uL |
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眼部（玻璃体）注射 |
1~2 uL |
1~3 uL |
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尾静脉注射 |
50~150 uL |
100~200 uL |
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腹腔注射 |
100~200 uL |
200~300 uL |
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皮下瘤注射 |
10~50 uL |
10~100 uL |
